你知道細胞破碎的哪幾種方法嗎

在細胞學實驗中，特別是植物細胞實驗中，經常遇到的細胞裂解相關實驗旨在通過非機械方法打破細胞壁的束縛，從而在細胞質或細胞核中完成DNA編輯相關操作的實驗方法。細胞破碎的方法是什么？總結方法如下：

細胞破碎

機械細胞損傷實際上是這樣的：通過固體或液體剪切強行打開細胞壁并溢出內容物。機械破碎的優點是不會引入可能干擾你想要提取的化學物質。然而，它很容易導致大分子內容物的失活。

1.研碗和研杵

研磨破壁法通常通過組織研磨機的研磨將植物組織樣本放入冷凍液氮中。當組織材料損壞時，添加溶劑可以提取代謝物。

2.珠磨法

珠磨法是指通過固體剪切將玻璃珠或磁珠添加到等量的細胞懸浮液和渦旋混合器中，使細胞裂解的方法。這種細胞裂解法的機械剪切力足夠溫和，可以保持細胞器的完整性，細胞破碎率高，適合大規模使用 用于各種細胞破碎。缺點是大分子內容易失活，漿液分離困難。

3.超聲波破碎儀

超聲均質器的工作原理是在浸泡在細胞溶液中的鈦探針中振動。它被稱為空化過程，形成和爆炸小氣泡，產生局部沖擊波，并通過壓力變化破壞細胞壁。這種方法非常適合植物和真菌細胞，但有一個缺點：噪音很大，所以必須在額外的房間里使用。

4.均質機破碎法

均質器在細胞上使用類似珠法的剪切力。細胞可以通過擠壓到比它們稍小的管道中進行均質化，從而切斷外壓力)或使用攪拌機中的旋轉刀片(轉子-定子處理器)。

5.冷凍破碎法

凍融循環在解凍過程中形成冰晶和細胞膨脹，較終導致破裂。用于藻類和軟植物材料。缺點是耗時。

6.高溫(微波、高壓釜)破碎法

高溫(和壓力)會破壞細胞壁中的鍵，使蛋白質變性。雖然速度很快，但如果你的應用受到熱損傷的影響，你較好找到另一種方法。

細胞裂解

非機械方 添加與分解細胞壁成分相關的酶或化學物質。它們通常與機械力相結合，以確保細胞完全受損。它們的缺點是細胞分解后難以分離。

1.酵素

天然酶可用于分離原生質體（無壁細胞）時去除細胞壁?？筛鶕褂玫纳锝M織樣本使用 溶菌酶如纖維素酶、幾丁質酶、溶菌酶(破壞肽聚糖)、甘露糖酶、聚糖酶(等)。

2.化學品

醇、醚或氯仿等有機溶劑可通過滲透細胞壁和細胞膜破壞細胞壁。如果你想提取疏水分子(如植物色素)，它們會更方便，因為它們會被收集在溶劑中。通常用于提取植物成分。EDTA細胞壁主要用于破壞革蘭氏陰性細菌 它的細胞壁含有由脂多糖組成的脂多糖Mg 2 和 Ca 2 等陽離子穩定。EDTA 它會螯合陽離子，在細胞壁上留下洞，使外來基因很容易穿透細胞壁到達細胞內部。